中文名：人脫氧核糖核酸酶ⅠELISA試劑盒，別名：人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA kit ，供應商：上海古朵生物，用途：用于測定人血清,血漿,組織及相關液體樣本中的含量或活性。性能：敏感性高，特異性強，重復性。保質期：6個月

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中文名：人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA試劑盒
別名：人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA kit
貨號：fk-m00197
供應商：上海古朵
規格：48t/96t
保存：2-8℃
有效期：6個月
標本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
使用范圍：僅供科研使用,不得用于臨床。
用途：用于測定人血清,血漿,組織及相關液體樣本中的含量或活性。
性能：敏感性高，特異性強，重復性。
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術要求，在檢測過程中除正常反應外，有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有：
①標本因素；
②試劑因素；
③操作因素。


人脫氧核糖核酸酶ⅠELISA試劑盒 原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
標本的處理：
（1）細胞培養上清液
根據需要用試劑盒中的標準稀釋液稀釋樣品，然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是稀釋5倍。
（2）腦脊液
根據需要用試劑盒中的標準稀釋液稀釋樣品，然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是5倍。
（3）血漿
①用EDTA2K離心收集在真空血液收集管中的血液，5,000×g，15分鐘，4℃，分離血漿樣品，然后儲存在零下80℃直到使用。
②用試劑盒中的標準稀釋液126倍稀釋血漿以避免血漿中的干擾物質影響檢測，按照說明書方法檢測。



人脫氧核糖核酸酶ⅠELISA試劑盒 液體類標本：
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
1）血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
2）血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4）細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/ 分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并 放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5）組織標本：
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。


人脫氧核糖核酸酶ⅠELISA試劑盒操作步驟：
1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣時將樣品加于酶標板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜，37℃孵育2小時。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體，甩干，每個孔中加入detection ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內配制)，酶標板加上覆膜，37℃溫育1小時。
3.棄去孔內液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約350μl /每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干。
4.每孔加hrp conjugate工作液(臨用前15分鐘內配制)100μl，加上覆膜，37℃溫育1小時。
5.棄去孔內液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl，酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據實際顯況酌情縮短或延長，但不可超過30分鐘。當標準孔出現明顯梯度時，即可終止)。
7.每孔加終止液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(od值)。應提前打開酶標儀電源，預熱儀器，設置好檢測程序。
9.實驗完畢后將未用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束。