人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)ELISA試劑盒用途，特異性：本試劑盒可同時檢測天然或重組的，且與其他相關蛋白無交叉反應。

中文名：人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)ELISA試劑盒
英文名：Human  GSH-Px ELISA kit
供應商：上海古朵
規格：96T/48T
保存條件：2-8℃低溫保存
特異性：本試劑盒可同時檢測天然或重組的，且與其他相關蛋白無交叉反應。
保質期：六個月
用途：ELISA法定量測定血清、血漿、細胞培養上清或其它相關生物液體中的含量。科研實驗等領域科學研究，不得用于臨床診斷
實驗原理：用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素，經過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。



人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)ELISA試劑盒用途 技術原理：
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
(2). 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
(3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。
(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。
(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復性好。以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。


人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)ELISA試劑盒用途 操作時需注意：
1.不同廠家生產的試劑盒因生產工藝和操作方法略有不同，務必按照所用人Opiorphin蛋白(OPI)ELISA試劑盒說明書嚴格操作，否則容易產生檢測結果的不確定性.
2.若不同批號ELISA試劑盒的不同組分(A液或酶工作液)，或不同試劑的不同組分進行交叉使用，有可能出現顯色淺或本底高，花板等情形。
3.反應時間的誤差，做大量標本時，一孔和后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。
4.臨界值附近標本波動為正常現象，任何試劑均不可避免。可以考慮將標本做奇數次復檢。
5.加樣時樣品量誤差，對于陰或很陽的標本影響不大，但對閾值附近的標本影響大，建議校對加樣器。



標本的收集：
用于ELISA測定的臨床標本為常用的是血清（漿），有時因為特定的檢測目的，也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標本。目前使用血清（漿）標本測定的標志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物、激素、特種蛋白、細胞因子和治療藥物等。
對用于激素和治療藥物測定的血清標本的收集，要注意收集時間甚或體位有可能會對測定結果產生影響。如可的松在早晨4：00—6：32之間，會有一峰值出現；生長激素、促黃體激素（LH）和促卵泡激素（FSH）均以陣發性方式釋放，因此，在測定此類激素時，有必要在密切相連的時間間隔內采取數份血樣本，以其中間值為測定值。
又如當從臥位變為站立位時，血清中腎素活性將出現明顯增高。再如治療藥物的檢測，應根據藥代動力學選擇服藥后的適時間抽血檢測。用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物和特種蛋白等的檢測的血清標本的收集則沒有時間和體位方面的影響。



人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)ELISA試劑盒用途 操作步驟:
1.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
2.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
3.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
4.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
5.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
6.溫育：操作同3。
7.洗滌：操作同5。
8.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
9.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
10.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。



注意事項：
1．  試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．  濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．  各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4．  請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．  底物請避光保存。
7．  嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8．  所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．  本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。