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中文名：維生素B1(VB1)ELISA 試劑盒
供應(yīng)商：上海古朵
規(guī)格：48t/96t
保存：2~8℃
有效期：6個(gè)月
樣本：血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
特點(diǎn)：敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便。
用途：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚(yú)等。
運(yùn)輸方式：現(xiàn)貨供應(yīng)，一般為快遞運(yùn)輸，江浙滬隔天到，外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。
檢測(cè)原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。



維生素B1(VB1)ELISA試劑盒 17 個(gè)相關(guān)操作技巧如下：

  1. 切記在加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
  2. 合理安排檢測(cè)量，以免反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。
  3. 在吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
  4. 務(wù)必做雙孔實(shí)驗(yàn)，這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，又能反映出試劑盒的度
  5. 樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性。
  6. 為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
  7. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑，請(qǐng)于 2-8℃ 保存。辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗人 IgG 工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗人 IgG 工作液。
  8. ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中，加樣后及時(shí)放人孵箱，標(biāo)本較多時(shí)，要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間，防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)y以清洗徹底。
  9. 剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng) 121℃ 高壓蒸汽滅菌 30 分鐘，或用 5.0g/L 次氯suan鈉等消毒劑處理 30 分鐘后廢棄。
  10. 人 ELISA 試劑盒洗滌時(shí)各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。
  11. 每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑，只是后加底物溶液及 2N H2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào) OD 值至零。
  12. 手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置 15～30s，不要將一個(gè)酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中，防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
  13. 對(duì)樣本的結(jié)果有疑問(wèn)時(shí)需要使用其他檢測(cè)方法進(jìn)行驗(yàn)證。
  14. 沒(méi)有去離子水或雙蒸水時(shí)，可以使用娃哈哈純凈水配制溶液，切勿使用自來(lái)水。
  15. 在使用微量加樣器時(shí)，吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭，即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
  16. 吸取液體時(shí)速度不易太快，以免產(chǎn)生氣泡，人 ELISA 試劑盒吸取的量不夠準(zhǔn)確。
  17. 吸取液體時(shí)要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸，減少誤差。



常見(jiàn)問(wèn)題以及解決方法：
1、試劑的選擇：選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的，但是在檢測(cè)之前還應(yīng)該提前半個(gè)小時(shí)將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍；
2、加樣中可能遇到的問(wèn)題：在做血清或是血漿用于檢測(cè)試劑的時(shí)候，會(huì)碰到血清血漿不好分離的情況，這個(gè)時(shí)候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時(shí)，然后在進(jìn)行離心處理；
3、洗板時(shí)容易造成誤差： 因?yàn)橄窗迨侨斯は吹模耘袛嗍裁磿r(shí)候洗干凈了也是人為判斷的，這個(gè)時(shí)候帶有主觀色彩，所以多清洗幾次，還有就是在洗的時(shí)候孔與孔之間的液體容易交叉流動(dòng)；
4、顯色問(wèn)題： 使用了過(guò)期的顯色劑或者是顯色劑用過(guò)后放置時(shí)間太長(zhǎng)，都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進(jìn)行顯色反應(yīng)的時(shí)候，要先查看顯色劑本身的情況；
5、終止反應(yīng)：在加終止劑的時(shí)候由于傾倒速度快，差生氣泡，造成假陽(yáng)性結(jié)果。所以在倒終止劑的時(shí)候要緩慢倒；
6、讀板：讀板的時(shí)候先應(yīng)該保證板的清潔干凈；
7、嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作。


維生素B1(VB1)ELISA試劑盒 操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。







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